技術(shù)文章
凱杰(QIAGEN)的RNA提取試劑盒種類非常多,針對(duì)不同的樣本來(lái)源(如血液、細(xì)胞、組織、植物等)和不同的RNA類型(總RNA、小RNA、miRNA等)有專門的系列。
其中經(jīng)典和常用的是 RNeasy系列(用于總RNA提?。O旅嬉?RNeasy Mini Kit (50) 為例,詳細(xì)介紹試劑盒中通常包含的組件。
重要提示: 不同試劑盒內(nèi)容物會(huì)略有差異,請(qǐng)務(wù)必以您手中的試劑盒說(shuō)明書(shū)為準(zhǔn)。
核心組件(以RNeasy Mini Kit為例):
一套標(biāo)準(zhǔn)的試劑盒通常包含以下物品:
凱杰rna提取試劑盒核心組件一:裂解結(jié)合體系
Buffer RLT: 裂解緩沖液。這是最關(guān)鍵的試劑,含有高濃度異硫氰酸胍(guanidine thiocyanate),能迅速裂解細(xì)胞并滅活RNase,保護(hù)RNA不被降解。
注意:使用前需按比例加入β-巰基乙醇(β-ME),β-ME是單獨(dú)提供的,不包含在試劑盒內(nèi),需用戶自備。
Buffer RW1: 洗滌緩沖液。用于第一次洗滌吸附在膜上的RNA,去除雜質(zhì)。
Buffer RPE: 洗滌和去鹽緩沖液(含乙醇)。用于第二次和第三次洗滌,能徹d去除鹽分和其他雜質(zhì),確保最終RNA產(chǎn)物的純度。
注意:使用前需按說(shuō)明書(shū)要求加入指定體積的無(wú)水乙醇。
凱杰rna提取試劑盒核心組件二:純化組件
RNeasy Mini Spin Columns: 離心柱。核心純化裝置,柱子底部有硅膠膜,能在高鹽條件下特異性地吸附RNA,而蛋白、DNA等雜質(zhì)則被洗去。
Collection Tubes (2 mL): 收集管。用于裝載離心柱并承接流穿液。通常有1.5 mL和2 mL兩種規(guī)格,提供足量。
凱杰rna提取試劑盒核心組件三:洗脫液
RNase-free Water: 無(wú)RNase水。用于最后一步將純化的RNA從硅膠膜上洗脫下來(lái)。這是確保RNA不被降解的關(guān)鍵。
凱杰rna提取試劑盒核心組件四:其他可能包含的組件(取決于您購(gòu)買的套餐)
蛋白酶K (Proteinase K): 用于消化蛋白含量特別豐富的復(fù)雜樣本(如動(dòng)物組織)。
DNase I (RNase-Free DNase Set): 通常需要單獨(dú)購(gòu)買,但有時(shí)會(huì)作為套餐的一部分。用于在純化過(guò)程中在柱上消化殘留的基因組DNA,避免DNA污染。如果購(gòu)買,會(huì)包含:
DNase I 干粉
Buffer RDD (用于溶解和稀釋DNase I)
凱杰rna提取試劑盒核心組件五:耗材
試劑盒通常不包含但實(shí)驗(yàn)必需的物品:
β-巰基乙醇(β-Mercaptoethanol)
無(wú)水乙醇(用于配制Buffer RPE)
1.5 mL無(wú)RNase的收集管(用于最后收集洗脫的RNA)
各種無(wú)RNase的槍頭和離心管
總結(jié)列表:
一個(gè)典型的RNeasy Mini Kit可能包含:
希望這個(gè)列表對(duì)您有幫助!實(shí)驗(yàn)前請(qǐng)務(wù)必閱讀具體的產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)。
選購(gòu)建議:
如果您處理的樣本含有大量基因組DNA(如基因組很大的動(dòng)植物組織),強(qiáng)烈建議同時(shí)購(gòu)買RNase-Free DNase Set,以便在純化過(guò)程中進(jìn)行柱上DNA消化,獲得更純凈的RNA。
購(gòu)買渠道:
凱杰代理——北京百奧創(chuàng)新科技有限公司,歡迎咨詢選購(gòu)。
北京百奧創(chuàng)新科技有限公司是一家專注于生命科學(xué)實(shí)驗(yàn)室快速消耗品為主營(yíng)方向的生命科技企業(yè),提供完整的產(chǎn)品和服務(wù)體系,為廣大的科研用戶提供實(shí)驗(yàn)室一站式服務(wù)。益元利康已成為多家生物品牌的代理商,如賽默飛、Sigma、ALZET、MedKoo、EZB、WaKo、Zymo research、Qiagen等,為用戶提供完善的產(chǎn)品、專業(yè)的咨詢,助力推動(dòng)中國(guó)生命科學(xué)研究快速發(fā)展。
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